在实时荧光PCR中。模板的定量有2种方法:***定量和相对定量。***定量一般通过已知的标准曲线来确定我们所感兴趣基因的拷贝数;相对定量指在一定样品中靶序列相对于另一参照序列的量的变化
相对定量:相对定量法又分为两种
比较标准曲线的相对定量法:在一定样本中,天津单核苷酸多态性SNP荧光定量PCR分析服务,靶序列相对于另一参照样本量变化情况进行分析的方法为相对定量法,天津单核苷酸多态性SNP荧光定量PCR分析服务,天津单核苷酸多态性SNP荧光定量PCR分析服务。在采用该方法过程中,需要有参照物,所以较容易绘制定量标准曲线,只要将标准品稀释度确定便可进行对比分析
荧光定量PCR(Flurogenic Quantitative Polymerase ChainReaction,FQ-PCR;real-time quantitative PCR, RT-qPCR or qPCR), 是1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术,它是通过荧光染料或荧光标记的特异性探针,标记PCR产物进行实时监测反应,利用与之相适应的软件对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度实时荧光定量PCR(Real-TimePCR)技术是在PCR技术的基础上发展起来的核酸定量技术,是1996年美国Applied
Biosystems公司推出,它是通过在PCR反应体系中加入荧光基团,然后利用荧光信号的积累强弱实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知的DNA模板进行定量。
实时荧光定量PCR在病原微生物检测中的应用
实时荧光定量PCR是通过荧光信号监测目的基因扩增数量的定量PCR技术,具有灵敏度高,检测速度快等优点。实时荧光定量PCR已被应用于乙肝病原微生物、登革热病原微生物、流感病原微生物、水疱口炎病原微生物等病原微生物的快速检测,在病原微生物快速分型、相似病原微生物的鉴别检测、耐药病原微生物突变体检测等临床和公共卫生领域得到广泛应用。狂犬病是危害严重的**共患病,病死率几乎为。实时荧光定量PCR技术已被应用于狂犬病病原微生物和狂犬病相关病原微生物的核酸检测,具有与金标准DFA相当的灵敏度和特异度,同时克服了金标准DFA的某些局限性,如检测速度更快,无需提取脑组织,对唾液、脑脊液等低病原微生物载量样本具有较好的检出效果,具有成为人间狂犬病诊断技术的潜力。灵敏度是传统RT-PCR的200倍以上,交叉污染的风险更低。实时荧光定量PCR也应用于欧洲蝙蝠病原微生物等狂犬病相关病原微生物的检测,可建立多重实时荧光定量PCR在单一检测体系对多种病原微生物进行快速鉴别,对于预防病原微生物性传染病具有重要的公共卫生意义。
文章来源地址: http://nongye.wwwjgsb.chanpin818.com/nlmyxmhz/deta_3858787.html
免责声明: 本页面所展现的信息及其他相关推荐信息,均来源于其对应的用户,本网对此不承担任何保证责任。如涉及作品内容、 版权和其他问题,请及时与本网联系,我们将核实后进行删除,本网站对此声明具有最终解释权。