[VIP第1年] 指数:3
一代PCR采用电泳的方式对PCR产物进行分析，主要的分析内容有：条带大小、条带数量、条带浓度等。根据电泳条带的这些信息能够实现研究者的某些实验目的，上海数字PCR定量分析服务，比如制备DNA片段、检测目的序列、对目的基因表达进行定性分析等。一代PCR的比较大缺点在于无法实现精确定量。概括一代PCR：看PCR产物的电泳条带。二代PCR即荧光定量PCR，它通过在反应体系中加入能指示反应进程的荧光试剂来实时监测荧光的积累，借助荧光曲线的Cq值来定量起始靶基因的浓度。但依赖于Cq值仍然是目前定量PCR比较大的技术瓶颈，只有在规范的实验流程、统一的设计思路下，得到的结果才具有可重复性和可比性。而且在低拷贝靶分子、模板浓度差异细微的条件下，其检测的灵敏度、精确度都受到了限制。概括第二代PCR：检测反应体系中荧光的实时变化，上海数字PCR定量分析服务，上海数字PCR定量分析服务。三代PCR即数字PCR应运而生，它采用直接计数目标分子而不再依赖任何校准物或外标，即可确定低至单拷贝的待检靶分子的精确数目。实现这一过程的关键在于采用某种分散手段，使一个完整的PCR体系分散成为成千上万个**的PCR体系，每个PCR体系中只包含一个或零个模板（实际每个微体系中的模板数符合泊松分布）。这样分别检测这些体系是否发生了PCR反应并且进行计数。
脂质组学：通过研究生物体内脂质的结构、功能、含量变化以及相互作用，揭示脂质代谢对机体生理病理状态的调控作用。 ***靶向脂质组技术是结合了非靶脂质“通量高”和靶向脂质“稳定准确”的双重优势，可一次性靶向检测1000于种脂质，既能有助于发现体内重要的关键脂质代谢物，也可以明确阐明脂质和疾病的关系。
样本要求：1.血清/血浆：200ul/sample，液氮速冻后-80℃保存。2.组织/粪便：200mg/sample，液氮速冻后-80℃保存 3.细胞：≥1×107/sample，液氮速冻后-80℃保存 注：干冰寄送;避免反复冻融;;尽量避免溶血。交付所有实验相关数据
数字PCR是一种核酸分子精确定量技术。是一个在模板DNA、引物(模板片段两端的已知序列)和四种脱氧核苷酸等存在的情况下，DNA聚合酶依赖的酶促合成反应，扩增的特异性取决于引物与模板DNA的特异结合。相较于qPCR，数字PCR可让你能够直接数出DNA分子的个数，是对起始样品的精确定量。数字 PCR 的工作原理在于将 DNA 或 cDNA 样品分割为许多单独、平行的 PCR 反应，部分这些反应包含了靶标分子（阳性），而其他不包含（阴性）。
单个分子可以被扩增一百万倍或更多。
在扩增期间，TaqMan® 化学试剂及染料标记探针可用于检测特定序列的靶标。 当不存在任何靶标序列时，没有信号累积。 PCR 分析后，阴性反应片段用于生成样品中靶标分子的精确计数，而无需标准品或内标。
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